Артемизия артемизинин, екстракция, малария СЪДЪРЖАНИЕ В АРТЕМИСИЯ АНУКАЛ Л ЕКСТРАКЦИИ, ПОЛУЧЕНИ ОТ РАЗЛИЧНИ МЕТОДИ

СЪДЪРЖАНИЕ НА АРТЕМИЗИНИН В АРТЕМИСИЯ АНУКЛЕКТИ L, ДОБАВЕНИ ОТ РАЗЛИЧНИ МЕТОДИ Soktoeva, G.L. Рижов, К.А. Дичко, В.В. Хасанов, С.В. Жшжитшапова, Л.Д. Държавен университет "Паднаид Бурят", ул. Смолин, 24а, Улан-Уде (Русия) Томски държавен университет, ул. "Ленина" 36, Томск (Русия) Байкалски институт за управление на природата, Сибирски клон на Руската академия на науките, ул. Сакхянова, 8, Улан-Уде (Русия)

Разглеждат се въпроси за изолирането на артемизинин от Artemisia annua L. и неговото количествено определяне с помощта на метода HPLC-MS. Артемизининът се изолира чрез различни екстракционни методи: мацерация, ултразвук и субкритична екстракция на СО2. Компонентният състав на CO2 и хексановите екстракти е изследван чрез GC-MS.

въведение

Артемизинин (1) е пероксиден сескитерпен [1], който е високоефективен антималариен препарат и прекурсор на по-мощни съединения като артеметер, артезунат и някои други. Значението на артемизинин и неговите производни се основава на много бързото действие на съединение от този тип срещу основния му патоген Plazmodium falciparum, който също причинява мозъчно заболяване. Химическият и биохимичният синтез на артемизинин се оказа много скъп и затова понастоящем не е жизнеспособен като основен източник на производство на артемизинин [2].

Маларията се причинява от микроорганизъм - Plasmodium malaria. Има 4 вида такива плазмодий, паразитни в човешкото тяло: Plazmodium vivax, P. ovale, P. malariae и P. falciparum. В средата на 20-ти век, благодарение на широкото използване на хинин и неговите производни, е било възможно значително да се намали броят на пациентите с малария. Въпреки това, от 60-те години. миналата година маларията отново напомни за себе си. Това се дължи на факта, че в Тайланд и Южна Америка се появи и разпространи в други региони малария Plasmodium (P. falciparum), устойчива на хинин, хлороквин, мефлокин и други лекарства на основата на хинолин [3, 4]. Проблемът с намирането на нови ефективни антималарни лекарства, сред които е предложен артемизинин, стана актуален. Това уникално съединение е открито в Китай (китайското име е qinghaosu). Работите са започнали през 1967 г. и са наречени “Програма 523” [5]. Изолиран е от пелин на годишната Atemisia annua L., която се разпространява на територията на бившия СССР, обхващаща областите Алтай, Забайкалия, Амурска област, Казахстан, Киргизстан, Узбекистан и Туркменистан. Пелинът е широко представен в Китай и други страни [6]. Общото количество на артемизинин, изолирано от различни части на A. annua, е около 0,01 и 1,4% от сухата листна маса [2].

Artemisia annua L. е основната суровина за производството на артемизинин. Световната здравна организация през 2001 г. препоръча използването на артемизинин в терапията на първа линия за контрол на маларията, което доведе до увеличаване на площта под една година пелин. Най-често пелин се отглежда ежегодно в Източна Азия, главно в Китай и Виетнам (70% от площта на световните запаси), наскоро въведена в културата в Източна и Южна Африка (20% от площта на световните запаси), което осигурява една четвърт от световните здравни нужди. [7].
В допълнение към артемизинин, A. annua се цени за своето етерично масло, което има характерен сладък, тревист аромат и се използва в парфюмерийните и козметични продукти. Освен това маслото има антибактериални свойства и може да се използва за лечение на кожни заболявания. В допълнение към сесквитерпеновите лактони, които имат основната терапевтична стойност, етеричните масла на това растение съдържат значително количество компоненти, които имат стойност, като 1,8-цинеолеум, артемизиев алкохол и кетон, борнеол и др. също анализира физиологичния ефект на липофилните екстракти върху кожата [2].
Във връзка с богатия и разнообразен състав на биологично активните вещества, съдържащи се в Artemisia annua, търсенето на нови области на растеж на годишен пелин е от голям интерес. В Република Бурятия расте 46 вида полинум [8], включително Artemisia annua L. Съдържанието на артемизинин в Полша, едногодишно, отглеждано в Бурятия, не е проучвано по-рано. Следователно, целта на тази работа е количественото определяне на артемизинин в екстракти, получени чрез различни екстракционни методи.

Експериментална част

Суровината за изследването е избрана надземна част от полската годишна Artemisia annua L., събрана през първото десетилетие на август 2010 г., във фазата на цъфтеж.
Извършва се изолиране на артемизинин и други биологично активни вещества (етерично масло) при използване на различни екстракционни методи: мацерация, ултразвукова екстракция и субкритична екстракция на СО2. Екстракция се извършва на лабораторни инсталации. Като екстрагенти бяха използвани хексан, етилацетат, етанол и СОг. Данните и параметрите на екстракция са показани в таблица 1. Екстрактите от утайката се отделят чрез центрофугиране в центрофуга OP-8UHL4.2 при 5000 rpm и след това се филтруват през филтърна система за проби.
Количественото определяне на артемизинин се определя чрез HPLC-MS, като се използва високоточен течен хроматограф Finnigan Surveyor, оборудван с автосамплер Plus и LC Pump Plus помпа с LCn Advantage MAX (йонна капка) Finnigan детектор, йонизационен метод - електроспрей. Колона "Hypersyl Gold" 150 х 4 mm, напълнена със силикагел с сорбент със С18 присадени фази (размер на частиците 5 цт), (произведен от Thermo electronic corporation, USA). Елуирането се извършва в изократен режим (50% (А): 50% (В)), съставът на изходния буфер (А) е воден разтвор на мравчена киселина (рН = 3) + 2 ml наситен разтвор на амониев ацетат, буфер за елуиране (В) - 100% ацетонитрил. Обемният дебит на елуента е 0,5 ml / min, обемът на инжектираната проба (автосамплер) е 25 μl. Регистрирането на йони се извършва в режим на наблюдение на положително заредени йони (Избрано йонно наблюдение, SIM), с молекулна маса 300 (поради добавянето на амониев йон NH4 към молекулата на артемизинин) с ширина на прозореца (299-301) m / z. Количественото определяне се провежда, като се използва вътрешен стандартен метод, като се използва стандартна проба от Sigma.

Методи и параметри на извличане

No. p / p Метод на екстракция Екстрактант Време за екстракция / параметри за екстракция Съдържание на артемизинин в%, по отношение на a.s.s.
1 Мацериране на етанол 24 h / съотношение на суровини: разтворители (1: 5) 0.040 ± 0.002
2 Мацерация етанол 48 h / суровини: съотношение на разтворители (1: 5) 0,038 ± 0,002
3 Мацериране на хексан 24 h / съотношение на проба: разтворител (1: 5) 0,039 ± 0,002
4 Етанол за ултразвукова екстракция 15 min / съотношение на суровини: разтворител (1: 5), честота на сигнала 50 Hz, T = 25 ° C 0,039 ± 0,002
5 Ултразвукова екстракция етил ацетат 15 min / суровини: съотношение на разтворители (1: 5), честота на сигнала 50 Hz, T = 25 ° C 0.022 ± 0.001
6 CO2-екстракция so2 24 h / дебит 30 l / h, T = 20-22 ° C, P = 6.0-6.2 MPa 0.054 ± 0.003

Освен това, летливите компоненти на СО2- и хексановите екстракти бяха изследвани чрез хроматография-масспектрометрия на газов хроматограф Agilent Packard HP 6890 с MSD 5973N квадруполен детектор. Използвахме 30-метрова кварцова колона TR-5 ms с вътрешен диаметър d = 0.25 mm, с дебелина на филма 0.25 μm. Хроматографското разделяне се извършва, както е описано в [9]. Качествено компонентите на екстрактите се определят чрез сравняване на пълния мас спектър с данните от библиотеката на хроматографските масспектрометрични данни за летливите вещества от растителен произход А.В. Tkachev, библиотеки NIST 08 и Wiley 275. Резултатите от анализа са представени в таблица 2.

Основните компоненти на CO2 и хексановите екстракти
Връх на пиковата площ Връзки Връзка на връхната област
Съединения с екстракт от хексан с екстракт от СОг
Екстракт от СО2 екстракт от хексан
Монотерпеноидни дълговерижни въглеводороди
Трицицилен 140181 - Трикозан 103969 52288
а-пинен 1155320 - Трикозен-1 1956324 -
Кампен 2021028 - п-пентакозан 534763 110485
R-pinen 371548 1683858 645634 - - -
n-хептакозан 279800 132358
3-карен

Циклични въглеводороди
лимонен
Pentacyclo 576196 -
R-phellandren 587143 - [7.5.0.0 (2.8).0 (5.14) 0.
1,8-цинеол 133599 - (7.11)] тетрадекан
Artemisia ketone 1413437 - 1,8-диметилфенантрен 3765681 1080289
Борнеол 170158 707945 - - Flyuoren 3507465 319501
Борнилацетат

дитерпеноидите
sesquiterpenoids
Метил 3,5-бис (етиламино) бензоат 627581 283913
Кариофилен 370714 214560 - -

Кариофилен оксид
Germacren D 214913 -
R-селинен 3053333 328535
a-cadinol 149485 -

Обсъждане на резултатите

Както може да се види от данните, представени в таблица 1, най-ниският добив на артемизинин е (0.022%) с ултразвукова екстракция с етил ацетат. Съдържанието на артемизинин в екстракти, изолирани чрез ултразвукова екстракция и мацерация с използване на различни разтворители (хексан, етилов алкохол), не се различава значително по 0,038-0,040% от гледна точка на A. p. При настояване с петрол с етилов алкохол годишно за 24 и 48 часа, съдържанието на артемизинин в получените екстракти е приблизително същото като 0,040 и 0,038%, съответно. Най-високият добив на артемизинин (0.054%) е получен по време на критичната екстракция на CO2. За сравнение, представяме някои данни за съдържанието на артемизинин в едногодишен пелин, растящ в различни територии. Artemisia annua L., която расте в различни части на Китай, съдържа от 0,01 до 0,22% артемизинин. Някои хибриди на годишен пелин, отглеждани в Китай и Виетнам, съдържат 1,0-1,5% артемизинин [10]. Съдържанието на артемизинин в A. annua, растящо на територията на бившия СССР, е следното (стойностите са дадени по въздушно сухи суровини): грузински SSR (0.005%), Киргизска SSR (0.025%), Молдовска SSR (0.01-0.02%), Краснодарска територия (0.04%), Украинска SSR (0.005-0.05%), Туркменистан (0.05% по отношение на a.s.c.), Казахстан (0.01-0.05% по отношение на A.S.S.) [11].
При изследването на състава на екстрактите от едногодишен пелин, получени чрез екстракция с CO2 и мацерация, при използване на хексан като екстрагент, хромато-масспектрометрията разкри значителни разлики в състава на тези екстракти. Монотерпеноидите, сескитерпеноидите, дълговерижните въглеводороди, цикличните въглеводороди и дитерпеноидите се откриват чрез метода на мас-спектрометрията.
Монотерпеноидите се срещат само в CO2 екстракта. Основните компоненти на СО2 екстракта са а-пинен, 3-карен, артемизиев кетон, (3-селена, трикозен-1, 1,8-диметилфенантрен и флуорен.

В хексановия екстракт от пелин с годишна газова хроматография-масспектрометрия бяха идентифицирани предимно дълговерижни въглеводороди и циклични въглеводороди, от сесквитерпеноиди беше открит 3-селенен.
В допълнение към артемизинин, който е от първостепенна лекарствена стойност, етеричното масло съдържа голям брой компоненти с биологична стойност, като артемизиев кетон, 1,8-цинеол, борнеол и др.

данни

1. Съдържанието на артемизинин в различни екстракти от A. annua (надземна част, фаза цъфтеж), отглеждани на територията на Република Бурятия, се определя чрез HPLC-MS.
2. Максималното съдържание на артемизинин се открива в екстракта на CO2 (0,054% по отношение на a.s.c.), t
3. С помощта на хроматографска масспектрометрия се изследва съставът на етеричното масло, екстрахирано с различни екстракционни методи.

Artemisia annua L.
Описание на таксона

Руски имена

таксономия

изображение

Растения на картата

Ботаническо описание

Artemisia annua L. Sp. пл. (1753) 847; Бес. в Nouv. Кор. Soc. Нат. Mosc. III, 81; Dc. Prodr. VI, 119; LDB. Fl. Рос. II, 592; Boiss. Fl. или. III, 371; Максим. в Бул. Акад. Sc. Petersb. Viii, 528; Хук. Fl. Бр. Ind. III, 323; Com. в ет. Манчу. III, 659; Накай, Ет. Корейски. II, 30; Fedch. Adyge. Сол. Тюрк. IV, 200; Rydb. North Am. Fl. 34, част 3, 259; Pampan. в Нуов. Giorn. Бот. Итал. n.s. XXXIV, 637; Хол и Клем. Artem (1923) 102; Com. и Алис. Res. Сол. Далечен Изток Кр. II, 1036; Krasheniny. в ет. югоизток. Europ. Част СССР, VI, 357; Grossg. Fl. Kavko. IV, 138; Krasheniny. и Wings. Fl. Зап. Sib. XI, 2816; Полякът. в Маевски, Флорида. 586. - A. chamomila Winkl. в Тр. Петербург университет. бот. Градина, X, 87; Fedch. оп. Оп. - Ic.: Amm. Stirp. RAR. т. 193, f. 23; Gmel. Fl. роднина. II раздел. 25. - Пр.: ГРФ № 3152. - Едногодишен пелин.

Годишен. Растението е ароматно, зелено, голи или с разпръснати, малки, съседни косми, с прави, оребрени, кафеникави или лилаво-кафеникави стъбла високи 30–100 cm. листата са пунктирани, вдлъбнати, на долната част на дръжката, 3-5 см дълги. и 2-4 см широки., овални, трикратно пикавични, сегменти от последния ред, продълговати, късоцевни; цели или с 1-2 зъба, 1-2 мм дълги. и 0.5 mm широка; средните и стеблевите листа са двойно перисто, горните приседнали, по-малки и по-малко сложни, най-горните прицветници са прости или с малък брой странични частици. Кошниците са сферични, широки 2-2,5 mm, многобройни, отхвърлени или увиснали, на къси крака, изтеглени заедно на къси клони, в б. м. дълго, пирамидално съцветие на метлика; обвивката е гладка, външните листа са линейно продълговати, зелени, вътрешно овални или почти кръгли, с широко оформена лъскава граница около ръба; съдът е изпъкнал, оголен; крайни пищялни цветя, 10–20 на брой, нишковидни влакна, дот-жлезисти, тясно линейни, ломовидни, тъпи, изложени на тръба; дисковите цветя са бисексуални, 12–30 на брой, тръбни с тясна капачка, голи; прашници тясно линейни, горният придатък удължен, остър-под ъгъл, долните дялове са много къси, заострени; колоната е по-къса от тичинките, стигмата на клеймото е линейна, права, леко отклонена, ресничка на върха; жълтеникави 0.8–0.6 mm дълги, продълговато-яйцевидни, плоски, на върха с малка заоблена платформа, едва оформени по ръба. Кол VIII - IX.

В бурените места в близост до жилища, градини, градини. - Европа. h.: Горен Днестър., Горен Днепър., Волж. Дон., Волга., Долна. Дон., Черна., Бес., Крим; Кавказ: Зап. И Изток. Транс., Тал., Ср. Азия: Арал-Касп., Балх., Й.-Тарб., Тиен-Шан., Сир-Дар., Пам. - Ал., Аму-Дар., Хорн. Туркменски. Тот. var.: Ср Heb., Srediz., Balk. -Maloaz., Arm.-Kurd., Iran, J.-Kashg., Kit., Jap., Mongolia, North. Америка (чужденец).

Видът на изгледа е на рисунките на Аман и Гмелин.

Домакинства. ВАЛ. Добивът на етерично масло е 0.1-0.64% (според Горяев). Според Joshikazu Imade (1937) цинеолът и субстанцията C10H6O са в маслото; това вещество е подробно проучено от Ashania и Joshitomi (1917); заедно с артемикакетон, неговият изомер, изоартемизиацетон, е намерен в масло. Този кетон е в състояние да се изолира от матерната луга, останала при получаването на полукарбозон на артемиацетон. Seisi Takagi (1928), продължавайки изучаването на японския A. annua, към 4-те компонента, известни в маслото, добави още 2 нови: кадинен и кариофилен. На базата на изследванията на Рутовски и Виноградов (1929), маслото се състои от а-пинен, цинеол, камфен, артемизиакетон и изоартемизиекетон, малко количество борнеол, оцетна и маслена киселини, кимуно алдехид (вероятно семикарбозон) и фенол (вероятно евгенол). Малко количество алкалоиди се открива в подземните части (Лазуриевски, Садиков, 1939; Масагетов, 1947). Според наблюденията в полето (Yunatov, 1954), в зелено състояние не се консумира от добитък. Наличието на алкалоиди се потвърждава от M.I. Горяева, Г.К. Круглихина, Е.И. Satdarova (1959).

Резюме и дисертация по медицина (04/14/02) по темата: Фармакологично изследване на Artemisia annua L. и Artemisia sieversiana Willd. флора на Бурятия

Резюме на дисертация по медицина на тема Фармакогностично изследване на Artemisia annua L. и Artemisia sieversiana Willd. флора на Бурятия

Като ръкопис

Соктеева Туяна Ердемовна

ФАРМАКОНОСТИЧЕСКИ ИЗСЛЕДВАНИЯ ARTEMISIA ANNUA L. И ARTEMISIA SIEVERSIANA WILLD. ФЛОРИЦИ НА БУРЯЦИЯ

04/14/02 - фармацевтична химия, фармакогнозия

Резюме на дисертация за степен "кандидат на фармацевтичните науки"

Дисертационната работа е извършена във Федералната държавна бюджетна образователна институция за висше професионално образование “Бурятски държавен университет” на Министерството на образованието и науката на Руската федерация и създаването на Руската академия на науките на Байкалския институт за управление на околната среда, Сибирски клон на Руската академия на науките

Научен ръководител: доктор по химични науки, професор

Раднаева Лариса Доржиевна

Официални опоненти: доктор по биологични науки, професор

Анцупова Татяна Петровна

Кандидат на фармацевтичните науки Монголов Ханхай Пурбуевич

Водеща организация: Пермска държава

Министерство на здравеопазването и социалното развитие на Руската федерация

Защитата ще се проведе на 23 декември 2011 г. в 10ч. На заседание на Дисертационния съвет DM 003.028.02 в Института по обща и експериментална биология на СО РАН на адрес: ул. Сакянова 6, Улан-Уде, 670047.

Дисертацията е достъпна в Централната научна библиотека на Бурятския научен център на СО РАН.

Резюмето е публикувано на 22 ноември 2011 г.

Научен секретар на дисертационния съвет кандидат на биологичните науки

ОБЩО ОПИСАНИЕ НА РАБОТА Съответствие на темата. Растенията от рода Artemisia (пелин) са обещаващи източници на биологично активни вещества, като естрагон пелин Artemisia dracunculus L., пелин Artemisia absinthium L., пелин Artemisia vulgaris L. е широко използван в народната, традиционната медицина и хранителната промишленост. Artemisia annua L., годишен пелин, беше успешно въведен в културата в много страни и през 2001 г. беше препоръчан от СЗО като основен източник на артемизинин, първа линия за лечение на малария. Днес страните, произвеждащи артемизинин, осигуряват около една четвърт от световните здравни нужди (Tolstikova, 2010; Xiao Wang, 2011). От едногодишните са изолирани 137 биологично активни съединения, включително 40 сесквитерпени, 10 тритерпени, 7 кумарини, 46 флавоноиди, които могат да служат като основа за разработване на лекарства (Bhakuni, 2001). През 80-те години на 20-ти век група учени (Шрьотер, 1989) се опитват да култивират диворастящия участък от едногодишната флора на СССР в CISA (Москва). Понастоящем в Томския държавен университет се извършват големи работи по въвеждането на първата година. В Бурятия n. Годишен е диворастящ вид.

Заедно с годишния паразит в Бурятия, широко разпространен е и пелинът на река Сиверс Artemisia sieversiana Willd, който също е обещаващ вид. Тревата Seabera съдържа флавоноиди, етерично масло, кумарини (Tkachev, 2002; Shatar, 1998; Hanina, 1999; Suleimenov, 2009). Етеричното масло на Sivers представлява интерес като източник на хамазулен, нетоксично съединение с противовъзпалителни, бактерицидни, регенеративни ефекти (Berezovskaya, 1991; Khanina, 1992).

Досега не е проведено подробно химическо изследване на пелин Сивер и пелин на годишната флора на Бурятия като обещаващи източници на биологично активни вещества, следователно тяхното проучване е неотложна задача.

Цел: Фармакогностично изследване на пелин на Сиверс Artemisia sieversiana Willd. и пелин годишен Artemisia annua L. като ценни източници на биологично активни вещества.

За постигането на тази цел е необходимо да се решат следните задачи:

1. Да се идентифицират анатомичните и диагностичните признаци на надземната част на Сивърс и П. на една година, за да се установят показатели за мърчандайзинг

суровини, оценка на резервите и възможността за събиране на едногодишни и п. Сиверса на територията на Република Бурятия;

2. Да се изследва химичният състав на основните групи биологично активни вещества от тези растения и да се определи тяхното количествено съдържание, да се установи локализацията на етерични масла и артемизинин в отделните части на растенията, да се изследва динамиката на тяхното натрупване в етапите на развитие и да се определят оптималните условия за събиране;

3. Да се разработи метод за количествено определяне на артемизинин в надземната част на едногодишната възраст;

4. Да се определят качествените показатели и стандарти за съдържанието на основните биологично активни вещества, да се разработи нормативна документация за лекарствените суровини - тревата от пелин на Сивърс и тревата от годишен пелин.

Научна новост. Установени са основните диагностични характеристики на тревата от Сивърс и П. Е. годишни, разработени са числените показатели, необходими за стандартизацията на суровините.

Беше направено изследване на химическия състав на тревата от Сиверс и на тревата от едногодишна трева. Определя се съдържанието на етерични масла, флавоноиди, мастни киселини, макро- и микроелементи. Флавоноиди - лутеолин-7-глюкозид, рутин, кверцетин и криоериол се откриват чрез HPLC-MS метода в тези растения. Основните мастни киселини в изследваните видове пелин са палмитинова, линолова, линоленова, 10% октадекенова киселина също се среща в значителна пелин.

Определени са условията за екстракция на артемизинин (вид екстрагент, метод на екстракция, време на екстракция) от годишната билка и е установено, че максималната екстракция на артемизинин се постига чрез ултразвукова и субкритична екстракция на СО2. Чрез HPLC-MS е установено, че най-голямото количество артемизинин в едногодишната възраст се съдържа във фазата на цъфтеж в съцветия.

Проучени динамиката на натрупване на етерично масло, в зависимост от фазата на развитие и част от завода. Най-голямото количество етерично масло от хамазулен р. Siversa се натрупва във фазите на пъпкуване и цъфтеж в съцветия.

Установените качествени показатели на БАН са включени в нормативните документи.

Практическо значение. Резервите и възможният годишен обем на снабдяване със селище Сиверс и селище на една година на територията на Република Бурятия (селище Сиверс - от 0,1 до 73,7 тона годишно, и селище с едногодишна - от 1,2 до 122,3 тона годишно).

Разработена е техника за количествено определяне на артемизинин в р. Grass чрез годишен HPLC-MS метод. Условията за подготовка на пробата на суровините за анализ за количествено определяне на артемизинин са научно обосновани.

Извършена е стандартизация на суровините, разработени са проекти за ПС - „Биърс пепел Сивърс“ и „Едногодишна трева за пелин“.

Степента на изпълнение. Методът за извличане на данни от етерично масло и микроскопски анализ е тестван и внедрен в учебния процес на Катедрата по фармация във Федералния държавен бюджетен образователен институт за висше професионално образование „Бурятски държавен университет” (Закон за изпълнение № 1 от 6 септември 2011 г.). Проекти на ФС на трева от пелин Сивер и едногодишен пелин са подготвени за разглеждане.

В защита се изваждат:

• резултатите от изследването на анатомичната структура, запасите, критериите за автентичност на Sivers и P., растящи в Бурятия;

• резултати от химическо изследване на биологично активни вещества и тяхната сезонна динамика на натрупване;

• резултати от проучвания за стандартизацията на надземната част на р. Сиверс и стр. Едногодишно.

Апробация на работа. Основните положения на дисертацията бяха представени и обсъдени на: научно-практическа конференция с международно участие „Развитие на традиционната медицина в Русия: опит, изследвания, перспективи” (Улан-Уде, 2010); 7-ми зимен симпозиум по хемометрия "Съвременни методи за анализ на данни" (Санкт-Петербург, 2010); международната научна конференция, посветена на 15-годишнината на Бурятския държавен университет "Актуални изследвания на Байкал Азия" (Улан-Уде, 2010); V международна научно-практическа конференция "Приоритети и особености на развитието на Байкалския регион" (Улан-Уде, 2011); X международна научно-практическа конференция "Проблеми на ботаниката на Южен Сибир и Монголия" (Барнаул, 2011); IV Всеруска конференция "Нови постижения в химията и химическата технология на растителните материали" (Барнаул, 2009); XVI Международна конференция на студенти, докторанти и млади учени "Ломоносов-2009" (Москва, 2009); XV Международна студентска конференция по екология "Екология на Русия и прилежащите територии" (Новосибирск, 2010); II Всеруска научно-практическа конференция на студенти, студенти и млади учени "Технологии и оборудване на химическата, биотехнологичната и хранително-вкусовата промишленост" (Бийск, 2009); All-руски научно-практическа конференция "Растителност

Байкал и прилежащите територии ”(Улан-Уде, 2011); V Училищен семинар на млади учени от Русия “Проблеми на устойчивото развитие на региона” (Улан-Уде, 2009); регионална младежка научно-практическа конференция с международно участие "Екологично чисти и ресурсо-спестяващи технологии и материали" (Улан-Уде, 2010).

Работата е извършена в рамките на научноизследователски проекти: RFBR: 08-04-90202-Mong_a "Изследване на биогенетичните модели на биосинтеза на биологично активни съединения на ендемични растения от Централна Азия" (2008-2009), 08-04-98037-r_sibir_a "Химичен състав на растенията като индикатор състоянието на екосистемите в района на Байкал “(2008-20 Юг); интердисциплинарен интеграционен проект № 93 "Развитие на научни изследвания в областта на медицинската химия и фармакология като научна основа за развитието на местни лекарства"; съвместен проект с Академията на науките на Монголия "Получаване на нови липо- и нанозомални форми на лекарства, използващи естествени суровини"; RFBR: 10-03-16001-mob_ros "Мобилност на млади учени" (2010), 11-03-90705-mob_st научна работа (обучение) на млади руски учени във водещи научни организации на Руската федерация 2011 (2011).

Публикации. Според резултатите са публикувани 17 научни статии, от които 3 са публикувани в периодични издания, препоръчани от Висшата атестационна комисия на Министерството на отбраната и науката на Руската федерация.

Обхват и структура на дисертацията. Дисертационната работа е представена на 172 страници на машинописния текст и се състои от въведение, преглед на литературата (1 глава), експериментална част (4 глави), общи заключения, списък с референции и приложения. Работата е илюстрирана с 37 таблици и 61 фигури. Библиографският индекс включва 139 източника, от които 42 чуждестранни.

В увода се обосновава уместността на темата, формулират се целите и задачите на изследването, представят се научната новост и практическото значение на работата.

В първата глава (преглед на литературата) са представени данни за химичния състав, спектъра на фармакологичната активност, употребата на рода Artemisia L. в традиционната и съвременната медицинска практика.

Втората глава (материали и методи) представя данни за обектите на изследване, използваните методи, устройства и реагенти, друга методологическа информация.

Третата и четвъртата глава съдържат данни за изследването на анатомичните и диагностичните признаци на Severs S и на една година. По метод

UV спектрофотометрията определя общото съдържание на флавоноиди и танини в обектите на изследване. С помощта на GC-MS беше изследван качествения и количествен състав на етерично масло и мастни киселини от пелин. Методът HPLC-MS установява качествено и количествено съдържание на флавоноиди. Елементният състав на растенията се определя чрез AAS метода. Разработена и предложена е техника за количествено определяне на съдържанието на артемизинин. чрез HPLC-MS. В допълнение, изследвахме химичните състави на етеричните масла от петте вида полиня, които най-често се срещат на територията на Бурятия и Монголия - Гмелинската пещера Artemisia gmelinii Web. et Stechm., пелин, сиво Artemisia glauca Pall, бивш див., пелин, голяма възглавничка Artemisia macrocephala Jacq. ex Bess., Sievers пелин Artemisia sieversiana Willd. и Artemisia annua L.

В петата глава са дадени данни за стандартизацията на билките от Сивърс и П. от едногодишната възраст, предложени като обещаващи източници на съответно хамазулен и артемизинин.

Основното съдържание на работата

Обекти и методи на изследване. Предмет на изследването са проби от треви от Сивери и годишни села, събрани в различни области на Република Бурятия (Иволгински, Прибайкалски, Селенгински, Тункински, Закаменски, Курумкански) на Иркутска област (остров Олхон) и Монголия (Селенгински аймак) през 2008 г. до 2011 г.

Микроскопски анализ се извършва в съответствие с статията "Техника на микроскопския анализ" (GF XI, брой 2) на микрометрови микроскопи (Lomo, Русия) с окуляр 10x; лещи 4x, 10x, 40x и MS-300 (TFXS), флуоресцентна система (Micros, Австрия) с окуляр 10x; лещи 4x, 10x, 40x. Добивът на суровините се определя по метода на счетоводните обекти.

Екстракцията на етеричното масло се извършва чрез хидродистилация, екстрактите се получават чрез ултразвукова екстракция, екстракция с СО2 и мацерация.

Изследването на качествения и количествен състав на тези обекти се извършва по следните методи - GC-MS, HPLC-MS, TLC, BC, UV спектрофотометрия и AAS. Хромато-мас-спектрометричният анализ се извършва на газов хроматограф Agilent 6890 с HP MSD 5973N квадруполен масспектрометър (Agilent Technologies, USA; колони: HP-5ms, g = 0.25 mm, дебелина на филма 0.25 цт (съполимер - 5%, дифенил) - 95% диметилсилоксан) и DBWax с вътрешен диаметър 0.25 μm, газ-носител - хелий, g) поток 1-1.5 ml / min; HPLC-MS анализът беше извършен върху високоефективни течни хроматографи Finnigan Surveyor (Thermo Scientific, USA) и Agilent 1200 (Agilent Technologies,

САЩ) с масово селективен детектор “LCQ Advantage MAX” (“йонна капан”) на марката “Finnigan” (Thermo Scientific, САЩ) и с тандем масов спектрометричен детектор (“йонна капка”) 6330 (Agilent Technologies, USA), метод йонизационен електроспрей; условия: Hypersyl Gold Cl8, 5 микрона, колони 150x4 mm (Thermo electronic corporation, USA) и Zorbax Eclipse C18, 5 микрона, 4.6 * 150 mm (Agilent Technologies, USA), скорост на потока на елуента 0.5 ml / min. TLC анализът се извършва на Sorbfil PTSH-P-A-UV плочи (Imid Ltd, Russia); BC анализът е извършен върху хартия FN 6 (Filtrak, Germany); Спектрите на абсорбция са записани на спектрометър StellarNet Green Waiv (StellarNet Inc, USA), AAC анализ е извършен на спектрофотометър SOLAAR MB (Thermo science, USA) и Varían модел AA240 (Varian, Russia).

Статистическата обработка на експерименталните данни беше извършена чрез метода на вариационно-статистически анализ. Част от данните бяха обработени от CIM (софтуерен пакет Sirius версия 6.0, Системи за разпознаване на модели, a / s, Норвегия).

Фармакологични характеристики на билките от P. Sivers и P. на лятото. Следните показатели за качеството на лекарствените суровини. Пасищна трева. Цели суровини. Твърди или частично покрити с листа върхове на цъфтящи стъбла с дължина не повече от 45 cm, които не съдържат груби части на стъблото. Стъблото космат, прави, оребрени и разклонени. Радикалните и средните листа са дръжки, широко-триъгълни, трикратни, триъгълни, продълговати плоски резени, 1.4 - 2.5 см дълги, 0.1 - 0.5 см широк Кошници полусферични, 0.4 - 0.6 см в диаметър, широки паникьозно съцветие. Краищата на розовите цветя (има около 18). Цветовете бисексуални, многобройни, с венчеобразна форма.

Едногодишна тревна пелин. Цели суровини. Твърди или частично покрити с листа върхове на цъфтящи стъбла с дължина не повече от 50 cm, които не съдържат груби части на стъблото. Стъблото е голо, прави, набраздено, зелено в началото на вегетационния период, тъмно лилаво в края. Листата на долната и средната стебла са яйцевидни или овални, дълги 1,5—7,0 cm на дръжка, елипсовидни по дължина, без крила, трикратно преекспресирани в широки сегменти, сегменти и сегменти, дълги от 0,5 до 0,8 cm, не широки повече от 0,2 см. Кошници с диаметър около 0,2 см в мехурчесто съцветие.

При провеждане на анатомично изследване на тревата на П. Сивърс и П. една година бяха идентифицирани редица анатомични и диагностични признаци. Структурата на листата на пелин е представена в Таблица 1. Стеблото на пелин на Сиверс е грубо, удължените клетки на епидермиса.

Има етерични мастни жлези, Т-образни коси и закръглени стомашни клетки. Стъблото има структура на греда. В ребрата са областите на тънките. Колантералните греди, разположени в кръг, се характеризират със силно развита склеренхима. Добре маркирана ендодерма, състояща се от големи, тънкостенни клетки с кръгла форма, плътно съседни една на друга.

Характеристики на анатомичната структура на листата на р. Sivers и р. Едногодишни __

Пелинът на пепел от сиверс годишен

горната права стена

долната стена на намотката е ниска

тип устигически апарат на горния аномоцит

по-ниска аномоцитна, устица повече, отколкото на горната страна на листа

Устицата е овална форма с лещиви стомашни клетки

Характеристики на гъсти космати косми с Т-образни косъмчета, състоящи се от дву-, четири-клетъчни крака и многоклетъчни жълтеникави косми, има два вида косми - звездни и Т-образни с многоклетъчен крак

Структурите, съдържащи терпеноиди, са многоклетъчни, големи етерични жлези. шизогенни съдове и неспециализирани паренхимни клетки

в точката на едногодишни, набраздени, почти голи стъбла, удължени клетки на епидермиса. В стъблото на едногодишното, както и в стъблото на с. Сивърс, пучков тип структура, има етерични мастни жлези, рядко косми и овални стомашни клетки; И при двата вида пелин епидермалните клетки на венцата на тръбните цветя са тънкостенни, удължени със заострени краища, характеризиращи се с наличието на голям брой етерични мастни жлези и отсъствието на косми.

На няколко партиди суровини са установени показатели за мерчандайзинг: t

Пасищна трева. Влажност (не повече от 7%), обща пепел (не повече от 11%), пепел, неразтворима в 10% солна киселина (не повече от 2%), екстрактивни вещества (не по-малко от 33%), листа кафяви и почерняли (не повече от 5%) ), органични примеси (не повече от 2%), минерални примеси (не повече от 0.5%).

Едногодишна тревна пелин. Влажност не повече от 7%, обща пепел (не повече от 9%), пепел, неразтворима в 10% солна киселина (не повече от 1%), екстрактивни вещества (не по-малко от 42%), листа кафяви и почернели (не повече от 5%), органични примеси (не повече от 2%), минерални примеси (не повече от 0.5%).

Според резултатите от предварителния фитохимичен анализ, есенциално масло, флавоноиди, танини, хидроксицинначни киселини, кумарини, мастни киселини и сесквитерпенови лактони са открити в тревата на Sivers и P.

Запаси от Сивърс и П. от една година. В таблица 2 са представени данни за добивите, биологичните (БЖ) и експлоатационните запаси (ЕЗ) на Сиверите, както и годишните, растящи в различни области на Бурятия.

Запаси от суровини на с. Сивърс и п. От едногодишни райони в Бурятия

площ на реколтата (g / m2) общо E свръхрастеж, (ha) BS (kg) EZ (kg)

Околна среда. Гр. Гусиноозерск 58.0 ± 4.1 0.8 530.0 398.4

Околна среда. а. Ganzurino 33.8 ± 2.4 0.4 154.4 116.0

Околна среда. а. Борати 220.6 ± 15.1 20.0 50160.0 41100.0

Околна среда. с Taphar 500.0 ± 26.3 0.5 2763.0 2237.0

Околна среда. а. Сотниково 240.2 ± 19.4 25.0 69750.0 52850.0

Околна среда. Улан-Уде 500.0 ± 32.5 0.5 2815.0 2175.0

Кабански район 285.SH = 19.7 30.0 97320.0 73680.0

Тункински окръг 70.0 ± 8.0 0.2 172.0 108.0

Прибайкальски район 280.9 ± 25.3 1.0 3315.0 2297.0

Курумкански район 370.6 ± 34.0 0.1 438.6 302.6

Околна среда. а. Hurumsha 228.0 ± 10.8 0.6 1497.6 1238.4

Околна среда. Население 500.0 ± 46.2 30.0 177720.0 122280.0

Околна среда. а. Сотниково 39.0 ± 2.1 25.00 10800.0 8700.0

Област Кабански 400.0 ± 27.1 30.0 136260.0 103740.0

Производителността на надземната част на пелин на Сивърс и годишният п. В изследваните гъсталаци варира от 33.8 ± 2.4 до 500.0 ± 32.5 g / m2 и от 39 ± 2.1 до 500 ± 46.2 g / m2, съответно. Биологичните и експлоатационни запаси на надземните части на изследваните растения са 154.4-973.0.0 кг и 116.0-73680.0 кг (пелин на Сиверс), 1497.6177720.0 кг и 1238.4-122280.0 кг (годишен пелин).

Химическо изследване на билките от П. Сивърс и П. от годишните флавоноиди. Общото количествено съдържание на флавоноидите се определя от общоприетия метод на спектрофотометрично определяне в трева на Sivers и P. Едногодишни, по отношение на лутеолин-7-глюкозид в различни фази на развитие на растенията (растителност, пъпки, цъфтеж, плод). Най-високото съдържание на флавоноиди е установено в проби от Severs и едногодишни проби, събрани в фазата на зародиш - 0.68 и 0.66%, най-ниска - в суровините, събрани във фазата на плодност - 0.31% и 0.38% (Таблица 3).

Количественото съдържание на флавоноидите по отношение на лутеолин-7-глюкозид в тревата на П. Сивърс и в тревата на П. една година в зависимост от вегетационната фаза

фаза на развитие на растението, количеството на флавоноидите, по отношение на лутеолин-7-глюкозид (%)

Пелинът от пелин в пелин годишно

растителност 0.67 ± 0.02 0.64 ± 0.04

пъпкуване 0.68 ± 0.05 0.66 ± 0.03

цъфтеж 0.48 ± 0.03 0.52 ± 0.02

плодните 0.31 ± 0.01 0.35 ± 0.01

Следните флавоноиди са открити чрез HPLC-MS метода: рутин, лутеолин-7-глюкозид, крио-ериол, кверцетин в тревата на Sivers и в тревата на едногодишна възраст (фиг. 1).

Фиг.1. Хроматограма на флавоноиди и P. Sivers, P. one-year.

За определяне на количественото съдържание на рутин, хризериол, кверцетин в тревата на Сиверс и в тревата на едногодишния възраст беше използван външен стандартен метод (Таблица 4).

В двата вида пелин, лутеолин-7-глюкозид 0.04–0.08% (Sivers) и 0.88–1.77% (n. Едногодишен) се съдържа в най-голямо количество, кверцетин 0.001% (Sivers) и 0.0070.009% (n).. годишно).

Количественото съдържание на флавоноиди (HPLC-MS)

Колекция флавоноиди от памук Sivers (%)

рутин кверцетин лутеолин-7-глюкозид

Иволгински район, окр. а. Taphar, 0.002 ± 0.0001 0.001 ± 0.0002 0.040 ± 0.003

Иволгински район, окр. стр. Сотниково 0.002 ± 0.0002 0.001 ± 0.0001 0.080 ± 0.005

FLY е една година и област Ivolginsky, okr. стр. Сотниково 0.018 ± 0.001 0.007 ± 0.0003 0.880 ± 0.004

Кабански район, окр. а. Хлебарка 0.012 ± 0.002 0.009 ± 0.0003 1.700 ± 0.005

Мастни киселини. Пробите от пелин съдържат от 8 до 13 мастни киселини. Общите за двата вида са палмитинова (16: 0), линолова (18: 2p6), линоленова (18: ZpZ) киселини, в количество от 56,87-82,67% (от общите мастни киселини) в Severs, 58,36-67,19% в n) една година (от общите мастни киселини). В допълнение към тези киселини, значително количество съдържа 10-октадекенова киселина (18: 1р8) от 3.64% до 11.65%. Също във всички проби са открити 10-метил-ундеканови (¡12: 0) и 12-метил-тетрадеканови (и 15: 0) киселини, чието съдържание не надвишава 1%. Хроматограмите са показани на фигура 2.

Фиг. 2. Хроматограми на мастни киселини (а) р. Sivers и (б) р. Едногодишни (I - (16: 0), 2 - (18: 2п6), 3 - (18: ЗПЗ), 4 - (18: 1п8) ).

Елементарен състав. В тревата на р. Sivers, която расте в различни райони на Бурятия, съдържанието на калций е 0.56 ± 0.02-0.89 ± 0.03%, магнезий - 0.12 ± 0.01-0.28 ± 0.01%. Най-високото съдържание на калций и магнезий е отбелязано в проби, събрани в Курумканския квартал, като най-ниско е съдържанието на магнезий в суровините от Тункинския район, а калций в растенията, събрани в Селенгинския район. Желязото се среща най-вече в растенията от Курумканския регион

(141,25 ± 12,13 mg / kg), по-малко - от Селенгинския район (141,25 ± 12,13 mg / kg).

Съдържанието на цинк варира от 23,73 ± 1,56 до 59,8 ± 1,56 mg / kg - п. Sivers и от 55.32 ± 0.83 до 66.50 + 0.89 mg / kg е едногодишен, което е приемливо за нормалното функциониране на биохимичните процеси. Съдържанието на мед е 8.42 ± 0.45-24.30 ± 1.56 mg / kg -n. Sivers, 9.37 + 0.18-13.48 + 0.44 mg / kg - една година (необходимото количество е от 5 до 30 mg / kg). Никелът в тревата Seabera съдържа 0,40 ± 0,01 -2,06 ± 0,03 mg / kg, което съответства на растителна нужда от 0,1 до 5 mg / kg. Съдържанието на кобалт в растението не трябва да надвишава 1 mg / kg, олово - 10 mg / kg, кадмий - 0,2 mg / kg, хром - 1,0 mg / kg (Kabata-Pendias, 1989; Kashin, 2009). В Sivers р. Съдържанието на кобалт е по-малко от 0,3 мг / кг, оловото е 3,19 ± 0,11 мг / кг, в р. Едногодишно - 0,59 ± 0,02 мг / кг, кадмий - 0,18 ± 0,02 мг / кг, хром - 0,76 ± 0,02 мг / кг във всички проби. Така, съдържанието на макро- и микроелементи е в концентрации, които са нормални и достатъчни за потока от жизнени функции за растенията.

Sivers пелин билка етерично масло. Етерично масло от растения се изолира чрез фармакопея метод № 2. В различни проби от р. Sivers съдържанието на етерично масло варира от 0.1 до 1.9%. В етеричните масла на Sivers, които растат в различни части на Бурятия, са идентифицирани повече от 80 съединения.

Изследвахме състава на етеричните масла, изолирани от тревата от пелин на Сивърс, който расте в различни части на Бурятия.

(Иволгински (1), Селенгински (2), Курумански (3), Прибайкальски (4.9),

Тункински (5), Закаменски (8), Иркутска област (остров Олхон) (6) и Монголия (7). Най-висок добив на етерично масло има в перушината Сиверс, която расте в Тункински и Курумкански райони (0,4%). Минималното количество масло е изолирано от растения, събрани на територията на Закаменски, Прибайкальски и Монголия (0,1%) (фиг. 3).

Динамиката на натрупване на етерично масло е изследвана в зависимост от фазата на развитие на растенията (фиг. 4). Резултатите показват, че в най-голямо количество маслото се натрупва в фазата на цъфтеж (0.6%), в

Фиг. 3. Добив на етерично масло п. Сивери от мястото на растеж.

фазите на пъпкуване и плододаване натрупват същото количество етерично масло (около 0,3%).

1- 1,8-данел I-терпинеал-4 3-р-фармацевт 1 * sishna-4,11-dnen

Фиг. 5. Хроматограма на етерично масло р. Sivers.

Фиг. 4. Добив на етерично масло p.

Сивери на различни фази на развитие на растенията (вегетационен период, б - пъпкане, с - цъфтеж,

Всички компоненти на етеричното масло могат да се разделят на две групи - постоянни, т.е. намиращи се в маслото във всички фази на развитие на растенията и спорадично появяващи се (незначителни). Във всички проби от етеричното масло на Sivers, независимо от площта на растениевъдството, 1.8-цинеол (2.34–22.57%), терпинеол-4 (0.964.70%), гермакрен E (8.66-12.36%), P-farnezen (0.64-5.17%), селина-4,11-диен (0.97-4.66%), нерил-2-метилбутаноат (4.80-8.79%) и хамазулен (0.60-25.36%) (фиг. 5).

Етеричните масла, изолирани от растенията, растящи в степните райони, в Прибайкальски район (25,36%), съдържат най-малкото количество хамазулен, а най-малко - в района на Закаменски (0,60%).

В състава на етеричното масло, изолирано от растенията на различни фази на развитие - растителност, пъпкуване, цъфтеж и плодоносене, са идентифицирани 54 съединения. Постоянните компоненти са 1,8-цинеол, линалоол, терпинеол-4, а-терпинеол, р-фарнезен, селина-4,11-диен, хамазулен.

Съдържанието на хамазулен варира от 0.20 до 24.69% в фазата на вегетация, от 21.34 до 61.91% в фазата на пъпкуване, от 1.53 до 34.42% в фазата на цъфтеж, от 10.87 до 20.64% във фазата на плодните. Съставът на спорадично появяващи се компоненти е значителен (до 40 съединения) едновременно с ниското им количествено съдържание, поради което е трудно да се определи зависимостта на техния състав от фазата на развитие на растенията.

За оценка на влиянието на фазата на развитие върху компонентите на маслото се използва CIM (фиг. 6).

Фиг. 6. GK-модел в зависимост от състава

етерично масло от фазата на развитие на Sivers (I-вегетация, 2-пъпките, 3-цъфтеж, 4-плодни)

това е един от анализа

многомерни данни, позволяващи да се разпределят скритите променливи в големи масиви от данни и да се анализират взаимоотношенията,

съществуващи в изследваната система. Целта на метода на основния компонент е да замени оригиналното описание на пробите с р променливи за нова форма, представена в пространството на основните компоненти (Esbenson, 2010).

На GK-модела е възможно да се разграничат отделните зони, разграничени една от друга и съответстващи на различните фази на развитие на пелин на Sivers, което показва, че съставът на маслото при различни фази на развитие се различава по съдържание на малки съединения.

По този начин, в различни фази на развитие на Сивърс, качественият състав на етеричното масло съвпада по постоянен начин и се различава в малки съединения.

Изследване на фазите на развитие на растенията показва, че най-голямото количество хамазулен в етеричното масло на Seversa е концентрирано в фазите на пъпкуване и цъфтеж, докато натрупването на масло в фазата на цъфтеж е по-голямо, отколкото в фазата на размножаване. Ето защо, по време на тези фази, ние изследвахме особеностите на натрупването на етерични масла в различни части на растението (фиг. 7).

За фазата на размножаване В фазата на цъфтеж

Фиг. 7. Добивът на етерично масло в различни части на Сивърс.

екстрахируемото етерично масло от различни части на растенията в цъфтящата фаза показва, че съцветията (кошници) се характеризират с най-висок добив, листата са по-малки, а стъблата са минимални. Във фаза

Пъпките в тревата на P. Sivers са най-вече съдържащи масло в пъпките, малко по-малко в листата и минималното количество масло в стъблата.

Анализът на етеричното масло от различни части на растението показа, че съставният състав на маслото, извлечено от съцветията и тревните пъпки на Sivers, е най-разнообразен е повече от 70 компонента, след това повече от 40 компонента от листата и по-малко от всички съединения в маслото, извлечено от стъблата, са около 20 компоненти. Постоянните компоненти на пробите от етерично масло, независимо от тяхното местоположение, са 1,8-цинеол, линалоол, терпинеол-4, гермакрен 13, а-терпинеол, а-бизаболол и хамазулен (Таблица 5).

Непрекъснати компоненти на етерично масло от пелин на Сивърс

съдържание на компонентите на компонентите в% от цялото масло

фаза на цъфтежа

съцветия оставя стъбла бутони оставя стъбла

1,8-цинеол 8,00 6,39 6,04 1,94 + 23,41

линалоол 5.93 1.38 0.65 + 3.83

терпинеол-4 2.56 2.10 0.57 0.88 + 5.37

a-терпинеол 2.39 2.10 0.82 1.44 + 4.66

Germakren E 7.20 7.81 1.96 11.18 7.81 10.57

а-бисаболол 2.28 1.25 1.66 5.24 10.93 5.86

Хамазулен 6.23 23.02 37.11 7.81 21.17 3.51

Анализът показа, че в различни райони на растеж, в различни фази на развитие и в различни части на Северса, качественият състав на етеричното масло съвпада постоянно и се различава в спорадично появяващите се съединения.

Етерично масло от годишна билка от пелин. Както и в първия случай, селекцията на етеричното масло се осъществява чрез фармакопеен метод No. Химичният състав на е. Етеричните масла е представен с 40 компонента. Постоянните компоненти са артемизиев кетон (10.24–14.62%), кариофилен (9.93–10.71%), гермакрен В (3.53–7.82%), р-селенен (21.75–29.46%), кариофилен оксид (4.44–14.31%) (фиг. 8).

На различни етапи от развитието на растението от билковото пелин се извлича от 0,5 до 0,7% етерично масло. Най-висок добив на етерично масло в фазата на цъфтеж (0.7%) (Фиг.9).

На всички етапи на развитие на растенията се съдържат артемизиен кетон, кариофилен (3-селен, кариофилнов оксид), а количественото съдържание на основните компоненти се променя на различни етапи от развитието на растенията. и кариофилен оксид - в фазата на цъфтеж.

3. Хроматограма на етерично масло р. Едногодишно.

Фиг. 9. Добив на етерично масло п. Годишен в различни фази на развитие на растенията (вегетация, б-пъпка, ц-цъфтеж, п-плод).

Етеричните маслени жлези са неравномерно разпределени в растението, поради което от различни части на растението могат да се разграничат етерични масла, които се различават както количествено, така и качествено.

Определени са особеностите на натрупване на етерични масла в цъфтящата фаза в различни части на годишния пелин (фиг. 10).

Повече от 60 съединения са открити в етерични масла от различни части на растението. постоянен

компоненти за масла от съцветия, листа, стъбла са артемизия алкохол, р-кариофилен, оксид

Основният компонент на годишното етерично масло е артемизиев кетон - той не се намира в маслото от стъблата, въпреки че е наполовина в маслото от съцветия (49.14%) и почти една трета от листата (29.76%).

Анализът на етеричните масла показва, че в различни райони на растеж, на различни фази на развитие и в различни части на годишната трева, както и на тревата на третите, качественият състав на етеричното масло е еднакъв по постоянен и различен в спорадично появяващи се компоненти.

Разработване на метод за количествено определяне на артемизинин в пелин с годишен метод HPLC-MS

Избор на условия за количественото извличане на артемизинин от годишния пелин. Да се разработи количествена методология

1, 2 от фиг. 10. Добивът на етерично масло в различни части на годишната (1-съцветие, 2-листа, 3-стъбла).

Определянията на артемизинин в тревата на Р на едногодишни условия на екстракция бяха подбрани, при които екстракцията на артемизинин достига своята максимална стойност. Бяха анализирани екстрактите, получени по методите на накисване, ултразвукова екстракция и субкритична CO2 екстракция. Като екстрагенти бяха използвани различни разтворители (Таблица 6). Съдържанието на артемизинин в екстрактите, разделени чрез ултразвукова екстракция и мацерация с използване на различни разтворители, не се различава значително (0,038-0,040%). Най-голямото количество артемизинин (0.054%) се съдържа в екстракта, получен при субкритична екстракция на СО2.

Методи и параметри за извличане на екстракти от тревата на пелин веднъж годишно чрез различни екстракционни методи ______

екстракционен метод за екстрахиране на екстрагентен метод / екстракционни параметри съдържание на артемизинин в%, по отношение на a.s.s.

етанол 24 ч. / съотношение на суровините: разтворител (1: 5), Т = 25 ° С 0,040 ± 0,002

Мацерация етанол 48 часа / съотношението на суровините: разтворител (1: 5), Т = 25 ° С 0,038 ± 0,002

Съотношение на хексан 24 часа / проба: разтворители (1: 5), Т = 25 ° С 0,039 ± 0,002

етилацетат 15 мин. / съотношение на суровините: разтворител (1: 5), честота на звучане 50 kHz, T = 25 ° С 0,022 ± 0,001

етанол 5 мин. / съотношение на суровините: разтворител (1: 5), звукова честота 50 KHz, T = 25 ° С 0,022 ± 0,001

Ултразвукова екстракция на етанол 10 мин. / Съотношение на суровините: разтворител (1: 5), звукова честота 50 KHz, T = 25 ° С 0,024 ± 0,001

етанол 15 мин. / съотношение на суровините: разтворител (1: 5), звукова честота 50 KHz, T = 25 ° C, C 0.039 ± 0.002

етанол 20 мин. / съотношение на суровините: разтворител (1: 5), звукова честота 50 kHz, T = 25 ° С 0,039 ± 0,002

CO2-екстракция на CO2 24 h.1 дебит 30 l / h, T = 20-22 ° C, P = 6.0-6.2MPa 0.054 ± 0.003

От всички предложени методи за екстракция, ултразвуковата екстракция е оптимална (етанолов екстрагент), тъй като този метод е бърз (време за екстракция 15 минути) и е достъпен чрез апаратура.

Метод за количествено определяне на артемизинин.

Разработването на техника за количествено определяне на артемизинин в билките на годишния един се извършва чрез HPLC-MS. Използвахме Agilent 1200 HPLC с MC-детектор ("йонна капан") 6330, йонизационен метод - електроспрей. Елуирането се извършва в изократен режим (50% (А): 50% (В)), съставът на изходния буфер (А) - воден разтвор на мравчена киселина (рН = 3) + 2 ml наситен разтвор на амониев ацетат, буфер за елуиране (В) - 100% ацетонитрил. Обемният дебит на елуента е 0,5 ml / min, обемът на инжектираната проба е -25 μl. Йони се записват в режим на наблюдение на положително заредени йони (SRM) с маса 300 (поради добавянето на йон NrH4 към молекулата на артемизинин), ширина на прозореца (299301) m / z. Резултатите се потвърждават чрез тандемна мас-спектрометрия, като дъщерен йон (MS2) с маса 223 m / z се получава от основния йон (MS) с маса 300 m / z.

Съвпадението на времената на задържане и масовите спектри на артемизинин, определено в тревата на едногодишна възраст с използването на СО разтвор на посоченото съединение, ни позволява да заключим, че чистото съединение е идентично с чистия артемизинин (Фиг. 11, 12).

Фиг. 11. Хроматограма на СО артемизинин и П. годишен екстракт.

iv ix язтжяауат асс »

Фигура 12. Масспектри на а) артемизинин, съдържащ се в п. Годишна трева, б) на артемизинин СО.

За хроматографско-масс-спектрометрия бе използван абсолютен калибрационен метод за количествен анализ. За да се определи коефициентът на калибровъчната крива, бяха приготвени няколко (най-малко 20) калибрационни разтвора на артемизинин. Приготвянето на разтворите се извършва, както следва: 5 х 10 "3 g артемизинин се претеглят, поставят се в мерителна колба от 50 ml, добавят се 25 ml ацетонитрил. Съдържанието на колбата

внимателно се смесва до пълно разтваряне, след което обемът в колбата се довежда до марката с дестилирана вода. Провежда се анализ при различен обем на инжектираната проба от 1 до 40 μl. Площта на пика в хроматограмите се измерва. Според получените данни е построена калибровъчна крива (фиг. 13). Стойностите на площта на пика се нанасят на ординатната ос и съответните стойности на съдържанието на артемизинин (g) се нанасят на ос на абсцисата.

От получените данни се изчислява коефициентът на калибровъчната крива: к = Б / х, където к е коефициентът на калибровъчната крива, 5 е площта на пика на анализирания разтвор, х е съдържанието на артемизинин (g)

Коефициентът на калибровъчната крива (k) се определя като средно аритметично на коефициентите k,.

Фиг. 13. Градуирана диаграма за определяне на съдържанието на артемизинин.

Съдържанието на артемизинин в едногодишния екстракт от пелин се определя по формулата: C = 5 / c, където 5 е площта на пика на артемизинин в анализирания разтвор и k е коефициентът на калибровъчната крива. Метрологичните данни за определянето на коефициента на калибровъчната крива (k) са дадени в таблица 7.

Метрологични характеристики на изчисляването на коефициента на калибровъчната крива артемизинин

1 X Е2 Е Р ЮУ) Дх Е,%

19 1.32 * 10m 1.84 * О15 4.25 * 10 "95 2.09 1.28 * 10" 1.97 1.90 * 10 "

Резултатите от количественото определяне на артемизинин в годишния екстракт от пелин са представени в таблица 8.

Резултатите от количественото определяне на артемизинин в екстракта от пелин едногодишен метод HPLC-MS

Метрологични характеристики (n = 5, P = 95%)

0.039 0.75 * 10 "0.27 * 10" 2 2.57 0.83 * 10 ° 1.21 0.12 * 10 "

Разработеният метод определи количественото съдържание на артемизинин в тревата № 1-годишна възраст в цъфтящата фаза (Таблица 9). Техниката е утвърдена - специфичност, потвърдена точност.

Съдържанието на артемизинин в тревата пелин годишно

Площ на Артемизинин и дата на събиране (%)

Иволгински район, на 10 км от Сотниково, 08/12/2010 0.054 ± 0.003

Иволгиний, 10 км от Сотниково, 08/22/2011 0.027 ^.001

Иволгински район, окр. а. Oriole, 08/19/2011 0.069 ± 0.004

Кабански район, окр. а. Таракановка, 08.22.2011 г. 0.023 ± 0.001

В проби, събрани в района на Иволгински, в околностите на Ориол съдържа най-голямото количество артемизинин (0,069%), най-малкото - в проби от област Кабан, окр. а. Хлебарка (0,023%). Установено е, че най-голямо количество артемизинин се концентрира в фазата на цъфтеж - 0.039%, а най-малката - във вегетационната и пъпките фази - от 0.006 до 0.007%. Съцветията Артемизинин съдържат - 0.029%, малко по-малко - 0.021% в листата, а минималното количество в стъблата е 0.007% (Таблица 10).

Съдържанието на артемизинин в тревата на пелин годишно, в зависимост от вегетационната фаза, в различните части на растението

фаза на развитие на централата

растителност пъпки цъфтеж листа съцветия стъбла

0,006 ± 0,0002 0,007 ± 0,0002 0,039 ± 0,003 0,021 ± 0,001 0,029 ± 0,002 0,007 ± 0,0002

Така оптималното време за събиране на тревата от годишния пелин е фазата на цъфтеж и е препоръчително да се събере цялата въздушна част.

Всички получени резултати са включени в проектите за ОС на тревата от пелин на Сивърс и билките от годишния пелин.

1. Разкрити са основните диагностични характеристики на тревата от Сивърс и П. едногодишна трева, разработени са числените показатели, необходими за стандартизацията на суровините. Идентифицират се резерватите на Сиверс и П., които растат в различни райони на Република Бурятия.

2. Съдържанието на флавоноиди, мастни киселини, макро- и микроелементи в тревата на Sivers n и в тревата на n. Флавоноиди - лутеолин-7-глюкозид, рутин, кверцетин и криоериол се откриват чрез HPLC-MS метода в тези растения. Основните мастни киселини в изследваните видове пелин са палмитинова, линолова, линоленова, 10% октадекенова киселина също се среща в значителна пелин.

3. Установено е, че качественият състав на растителните етерични масла остава постоянен, независимо от мястото на растеж и фазата на развитие. Постоянните компоненти на Sivers са 1,8-цинеол, терпинеол-4, D гермакрен, p-фарнезен, селина-4,11-диен, неил-2-метилбутаноат и шамазулен, и Artemisia ketone, karyofillen, germacrene one year old D, р-селена, кариофилен оксид. Натрупването на етерично масло при фазата на цъфтеж е по-голямо (0.7%), отколкото в фазата на пъпкуване (0.3%). Най-голямо количество хамазулен р. Sivers се натрупва в фазите на пъпкуване (до 62%) и цъфтеж (до 34%).

4. Определени са условията за извличане на артемизинин (вид екстрагент, метод на екстракция, време за екстракция) от годишната билка и е установено, че максималната екстракция на артемизинин се постига с ултразвукова и прецизна екстракция на СО2. Разработен е метод за количествено определяне на артемизинин и е валидиран с едногодишен HPLC-MS метод (относителна грешка на определяне на ± 1,21%). Установено е, че най-голямото количество артемизинин в тревата на годишна билка се натрупва по време на цъфтежа в съцветия (0,039%).

5. Разработени нормативни документи за суровините - проект на ФС „Трева от пелин на Сивърс” и проект на ФС на „Трева от пелин една година”.

Списък на публикациите, публикувани по темата на дисертацията

1. Zhigzhitzhapova, C.B. Химичният състав на етеричното масло Artemisia gmelinii Web. et Stechm, роден в Централна Азия / C.B. Жижицхапова, Т.Е. Соктоева, Л.Д. Раднаева и Химия на растенията.-2010.-№2.-С. 131-133.

2. Жижицхапова, C.B. Химичен състав на етерично масло от пелин на Сиверс Артемизия сиверсиана Уилд., Отглеждано в Бурятия / С.В.Жижицхапова, Т.Е. Соктоева, Л.Д. Раднаева, В.В. Тараскин // Бюлетин на Бурятския държавен университет. Ser. Chemistry-физика. - 2009. -С. 3. - стр. 69-71.

3. Жижицхапова, C.B. Състав на ефирното масло от пелин на Сиверс Artemisia sieversiana Willd., Отглеждано в Бурятия и Иркутска област / С.В.Жижицхапова, Т.Е. Соктоева, Л.Д. Раднаева, В.В. Тараскин // Бюлетин на Източно-Сибирския научен център на Сибирския клон на Руската академия на медицинските науки. - 2009. - №2 (66). -С. 103-105.

4. Жижицхапова, С.В. Съставът на етеричното масло Artemisia sieversiana Willd. на различни фази на развитие на растенията / S.V. Жижицхапова, Т.Е. Соктоева, Л.Д. Раднаева // Бюлетин на Източно-Сибирския научен център на Сибирския филиал на Руската академия на медицинските науки. - 2011. - №1 (77). Част 2. - стр. 138-141.

5. Соктоева Т.Е. Компонентният състав на етеричното масло Artemisia glauca Pall, ex Willd. флора на Монголия / T.E. Соктоева, С. В. Жижицхапова, ЛД

Radnaeva, B.B. Тараскин // Бюлетин на млади учени. - Томск, 2011. - Вип. 2. - стр. 27-30.

6. Соктоева Т.Е. Химичният състав на етеричното масло Artemisia gmelinii Web. Et Stechm. / T.E. Соктоев // Ломоносов-2009: материали от XVI стаж. Conf. студенти, студенти и млади учени. - Москва, 2009. - стр. 37.

7. Zhigzhitzhapova, C.B. Етерично масло от пелин Gmelin флора Бурятия и Монголия / C.B. Жижицхапова, Т.Е. Соктоева, Л.Д. Раднаева // “Нови постижения в химията и химическата технология на растителните суровини”: материали от IV Русия. научен. Conf. - Барнаул, 2009. - стр. 49-50.

8. Соктоева, Т.Е. Съставът на етеричното масло от пелин на Сиверс Artemisia sieversiana Willd., Който расте в Република Бурятия / T.E. Soktoyeva, C.B. Жижицхапова, Л.Д. Раднаева // “Технологии и оборудване на химическата, биотехнологичната и хранително-вкусовата промишленост”: материали на II-теросес. Scien. Conf. студенти, студенти и млади учени. - Бийск, 2009. - стр. 91-93.

9. Павлова Е.Т. Хроматографско разделяне и количествено определяне на компонентите на лекарствата чрез HPLC / TE Soktoeva, T.A. Колодин // “Проблеми на устойчивото развитие на региона”: материали от V-то училище-семинар на млади учени от Русия. - Улан-Уде, 2009. - стр. 222-223.

10. Жижицхапова, С.В. Сравнителен анализ на химичните състави на Artemisia L., растящи в Централна Азия / S.V. Жижицхапова, Т.Е. Soktoeva, L.D. Раднаева, О. Грах-Нилсен // “Модемни методи за анализ на данни” Седма зимен симпозиум по хемометрия. - Санкт-Петербург, 2010. - с. 82-83.

11. Соктоева, Т.Е. Сравнителен анализ на състава на етеричните масла от полиния на рода Artemisia L., отглеждани в Централна Азия / ТЕ t Соктоева // "Екологично чисти и ресурсоспестяващи технологии и материали": материали от региона, младежки научен. Conf. от стажант. участие. - Улан-Уде, 2010.-S. 109-110.

12. Zhigzhitzhapova, C.B. Етерични масла от вида Artemisia L. / C. Жижицхапова, Т.Е. Соктоева, Л.Д. Раднаева // “Развитието на традиционната медицина в Русия: опит, изследвания, перспективи”: материали научни. Conf. от стажант. участие. - Улан-Уде, 2010. - стр. 405-407.

13. Соктоева, Т.Е. Съставът на етеричното масло от братя и сестри пелин Artemisia sieversiana Willd. / T.E. Soktoyeva, C.B. Жижицхапова, Л.Д. Раднаева // “Актуални изследвания на Байкал Азия”: материали на Интер. Scien. Conf, - Ulan-Ude, 2010. - стр. 309-312.

14. Бадмаева, Е.Е. Съставът на етеричното масло Artemisia macrocephala Jacq. ex Bess. расте в Монголия / Е.Е. Badmaeva,

ТЕ Соктеева // “Екология на Русия и прилежащите територии”: материали от ХVIII. екологичен кон. - Новосибирск, 2010. - с. 325.

15. Бадмаева, Е.Е. Съставът на етеричното масло Artemisia annua / EE. Бадмаева, Т.Е. Soktoyeva, C.B. Жижицхапова, Л.Д. Раднаева // "Екологосъобразни и ресурсоспестяващи технологии": материали Всерос. младежка конференция от стажант. участие. - Улан-Уде, 2011. - C. 156-157.

16. Соктоева, Т.Е. Екстракция на артемизинин от пелин годишно Artemisia annua L. / T.E. Soktoeva, G.L. Рижов, К.А. Дичко, В.В. Khasanov, C.B. Жижицхапова, Л.Д. Раднаева // “Приоритети и особености на развитието на Байкалския регион”: материали от V международен. Scien. Conf. - Улан-Уде, 2011. - стр. 127-128.

17. Zhigzhitzhapova, C.B. Химичният състав на Artemisia annua L. / C.B. Жижицхапова, Т.Е. Соктоева, Л.Д. Раднаева // “Растителност на Байкал и съседните територии”: материали от Всерос. Scien. Conf. - Улан-Уде, 2011. - стр. 152-153.

ААС абсорбционна спектрофотометрия

м.н. абсолютно сухи суровини

BAS биологично активни вещества

Биологични резерви на ГЗ

BH хартиена хроматография

Световна здравна организация на СЗО

HPLC-MS високоефективна течна масова хроматография

GF Държавна фармакопея

ISC метод на основните компоненти

CO стандартна проба

тези тънкослойни хроматографии

Оперативни резерви на EZ

SRM Изберете Мониторинг на реакцията

Авторът изразява искрената си благодарност към научния ръководител, доц., Проф. Л. Д. Раднаева, както и доктор, доцент, старши научен сътрудник Байкалски институт за управление на природата на Сибирския клон на Руската академия на науките Жигжичапова К.Б., доктор по химия, почетен професор Томски държавен университет Рижова Г.Л. за помощ и подкрепа при подготовката на дисертацията.

Форматът е 60x84 1/16. Офсетова хартия. Обем 1,5pech. л. Тираж 100. Номер на поръчката 67.

Отпечатано в печатницата на издателство BNTS SB RAS. 670047 Улан-Уде, ул. Сахянова, 6.

Съдържание на тезата на Соктоев, Туяна Ердемовна :: 2011 :: Улан-Уде

Глава 1. ПРЕГЛЕД НА ЛИТЕРАТУРА

Сегашното състояние на изследванията върху изследването на рода Artemisia L.

1.1. Ботаническа характеристика на пелин на Сивърс и 12-ти годишен пелин

1.2. Етерични масла и естествени азуленови растения от рода Wormwood

1.2.1. Химичният състав на етеричните масла и естествените азулен 14 растения от рода Wormwood

1.2.2. Използването на етерични масла от растения от рода Wormwood в медицината

1.2. Артемизинин: откритие, структура и синтез, физикохимични свойства, механизъм на действие на антиплазмодиум

1.3. Мастно-киселинен състав на растенията от рода Wormwood

1.4. Фенолни съединения на растения от рода Wormwood

1.5. Елементният състав на растенията от рода Wormwood 38 ЗАКЛЮЧЕНИЯ КЪМ ГЛАВА

ГЛАВА 2. ХАРАКТЕРИСТИКИ НА ОБЕКТИТЕ И МЕТОДИТЕ 41 ИЗСЛЕДВАНИЯ

2.1. Обекти на изследване, проби от суровини - трева от пелин на Сивърс и 41 билки от пелин годишно

2.2. Изследователски методи

2.2.1. Методи за биологични изследвания

2.2.1.1. Анатомично и диагностично изследване

2.2.1.2. Изследване на ресурсите

2.2.2. Методи за качествено и количествено определяне на 43 биологично активни вещества

2.2.3. Анализ на мерчандайзинга: методи за установяване на 50 добри суровини

2.2.4. Методи за статистическа обработка. Методът на основния компонент.

ГЛАВА 3. ФАРМАКОНОСТИЧЕСКИ АНАЛИЗ НА БИЛКОВ ХЕРБАЛИС 53 ГРАДОВЕ

3.1. Микроскопски анализ на трева от пелин на Сивърс

3.2. Запаси от пещера на Сибърс

3.3. Изследването на основния траве братя и сестри пелин

3.3.1. Качествено и количествено съдържание на компонентите 64 етерично масло от пелин на Сивърс

3.3.1.1. Химичният състав и динамиката на натрупване на етерично масло и 64 хамазулени в тревата на пелин в Сиверите в различни райони на Бурятия

3.3.1.2. Особености на натрупване на етерично масло и хамазулен в тревата от 65 перушина на различни етапи от развитието на растенията

3.3.1.3. Натрупването на второстепенни компоненти на етеричното масло от тревата 71 Sivers пелин

3.3.1.4. Характеристики на натрупване на етерично масло и хамазулен в тревата 72 Sivers пелин от различни части на растението

3.3.2. Качественото и количествено съдържание на флавоноиди и танини в тревата на пелин на Сивърс

3.3.3. Мастно-киселинен състав на тревата от пелин на Сивърс

3.3.4. Елементарен състав на билковия пелин годишно ЗАКЛЮЧЕНИЯ НА ГЛАВА. T

ГЛАВА 4. ФАРМАКОНОСТИЧЕСКИ АНАЛИЗ НА БИЛКОВИ БИЛКОВЕ 83 ЕДНА ГОДИНИ

4.1. Микроскопски анализ на билковия пелин годишно

4.2. Запаси от пелин годишно

4.3. Изследването на основната трева на пелин в BAS годишно

4.3.1. Качественото и количествено съдържание на компонентите на етеричното масло в билковия пелин годишно

4.3.1.1. Химичният състав и динамиката на натрупване на етерично масло в 92 треви от едногодишен пелин от различни места на растеж

4.3.1.2. Особености на натрупване на етерично масло в тревата от пелин ^ годишно на различни фази на развитие и в различни части на централата

4.3.2. Качествено и количествено определяне на флавоноиди трева 100 пелин годишно

4.3.3. Състав на мастни киселини в билковия пелин годишно ^ ® *

4.3.4. Елементният състав на билковия пелин годишно

4.4. Разработване на метод за количествено определяне на артемизинин в 103 треви от пелин по годишен метод на HPLC-MS

4.4.1. Избор на условия за количествено извличане на артемизинин от 103 едногодишни пелин

4.4.2. Разработване на техника за количествено определяне на артемизинин 104 чрез HPLC-MS

4.4.3. Количествено съдържание на артемизинин в годишния пелин от различни места на растеж

4.4.4. Анализ на количественото съдържание на артемизинин в тревата годишно на различни етапи на развитие и в различни части на растението

ГЛАВА 5. УСТАНОВЯВАНЕ НА ПОКАЗАТЕЛИТЕ 111 ДОБРОСТ НА СУРОВИНИ

5.1. Морфометрични показатели на суровините

5.2. Стандартизация на пелин за трева с братя и сестри

5.2.1. Търговски индикатори за трева Прагове от пелин!

5.2.2. Стандартизация на билки от пелин в Сиверс според съдържанието на 115 хамазулела в състава на етеричното масло

5.2.3. Установяване на срока на годност на пелинската трева

5.3. Стандартизация на билковия пелин годишно ^ ^ ^

5.3.1. Стойност показатели трева чесън годишен * '^

5.3.2. Стандартизация на билковия пелин върху съдържанието на артемизинин

5.3.3. Установяване на срока на годност на билковия пелин годишно

Въвеждане на дисертация на тема "Фармацевтична химия, фармакогнозия", Соктеева, Туяна Ердемовна, реферат

Съответствие на темата. Растенията от рода Artemisia (пелин) са обещаващи източници на биологично активни вещества, като естрагон пелин Artemisia dracunculus L., пелин Artemisia absinthium L., пелин Artemisia vulgaris L. е широко използван в народната, традиционната медицина и хранителната промишленост. Artemisia annua L., годишен пелин, беше успешно въведен в културата в много страни и през 2001 г. беше препоръчан от СЗО като основен източник на артемизинин, първа линия за лечение на малария. Днес страните, произвеждащи артемизинин, осигуряват около една четвърт от глобалните здравни нужди [1, 2]. От едногодишните са изолирани 137 биологично активни съединения, включително 40 сесквитерпени, 10 тритерпени, 7 кумарини, 46 флавоноиди, които могат да служат като основа за разработване на лекарства [3]. През 80-те години на 20-ти век група учени [4] се опитват да култивират диворастящия участък от едногодишната флора на СССР в ULI (Москва). Понастоящем в Томския държавен университет се извършват големи работи по въвеждането на първата година. В Бурятия n. Годишен е диворастящ вид.

Заедно с едногодишното в Бурятия, пещерата Сиверс Artemisia sieversiana Willd е широко разпространена, която също е обещаващ вид. В тревата на P. Sievers се съдържат флавоноиди, етерично масло, кумарини [5-8]. Етеричното масло на Seabera представлява интерес като източник на Хамазулен, нетоксично съединение с противовъзпалително, бактерицидно, регенеративно действие [9, 10].

За постигането на тази цел е необходимо да се решат следните задачи:

1. Определете анатомичните и диагностични особености на надземната част на р. Сивърс и стр. Едногодишно, установете стоковите показатели на суровините, оценете резервите и възможността за събиране на едногодишни и сиверски на територията на Република Бурятия;

Установените качествени показатели на БАН са включени в нормативните документи.

Практическо значение. Резервите и възможният годишен обем на закупуване на селище Сиверс и селище на една година на територията на Република Бурятия (селище Сиверс - от 0,1 до 73,7 тона годишно, и селище с едногодишни - от 1,2 до 122,3 тона годишно).

Апробация на работа. Основните положения на дисертацията бяха представени и обсъдени на: научно-практическа конференция с международно участие „Развитие на традиционната медицина в Русия: опит, изследвания, перспективи” (Улан-Уде, 2010); 7-ми зимен симпозиум по хемометрия "Съвременни методи за анализ на данни" (Санкт-Петербург, 2010); международната научна конференция, посветена на 15-годишнината на Бурятския държавен университет "Актуални изследвания на Байкал Азия" (Улан-Уде, 2010); V международна научно-практическа конференция "Приоритети и особености на развитието на Байкалския регион" (Улан-Уде, 2011); X международна научно-практическа конференция "Проблеми на ботаниката на Южен Сибир и Монголия" (Барнаул, 2011); IV Всеруска конференция "Нови постижения в химията и химическата технология на растителните материали" (Барнаул, 2009); XVI Международна конференция на студенти, докторанти и млади учени "Ломоносов-2009" (Москва, 2009); XV Международна студентска конференция по екология "Екология на Русия и прилежащите територии" (Новосибирск, 2010); II Всеруска научно-практическа конференция на студенти, студенти и млади учени "Технологии и оборудване на химическата, биотехнологичната и хранително-вкусовата промишленост" (Бийск, 2009); Всеруска научно-практическа конференция "Растителността на Байкалския регион и прилежащите територии" (Улан-Уде, 2011); V Училищен семинар на млади учени от Русия “Проблеми на устойчивото развитие на региона” (Улан-Уде, 2009); регионална младежка научно-практическа конференция с международно участие "Екологично чисти и ресурсо-спестяващи технологии и материали" (Улан-Уде, 2010).

Работата е извършена в рамките на изследователски проекти: RFBR: № 08-04-90202-Monga „Изследване на биогенетичните модели на биосинтеза на биологично активни съединения на ендемични растения в Централна Азия” (2008–2009), № 08-04-9803 7-рсибиря

Химичният състав на растенията като показател за състоянието на екосистемите в Байкальския регион (2008-2010 г.); интердисциплинарен интеграционен проект №93 "Развитие на научни изследвания в областта на медицинската химия и фармакология като научна основа за развитието на местни лекарства"; съвместен проект с Академията на науките на Монголия "Получаване на нови липо- и нанозомални форми на лекарства, използващи естествени суровини"; RFBR: № 10-03-16001-mobzros “Мобилност на млади учени” (2010), №11-03-90705-mobst научна работа (обучение) на млади руски учени във водещи научни организации на Руската федерация 2011 (2011).

В защита се изваждат:

• резултати от проучвания за стандартизацията на надземната част на р. Сиверс и стр. Едногодишно.